- L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤细胞
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L-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤细胞
细胞生长:悬浮
细胞形态:上皮细胞样
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3传代,2-3天传一代
细胞纯度:92.2%
细胞活力:88.4%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
细胞检测:细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌
细胞冻存:液氮冻存(*培养基+10%DMSO+20%FBS)
细胞运输:干冰运输(1 Vial)或活细胞运输(T-25 flasks)
细胞用途:只可用于科研,不可用于临床诊断和治疗
L-540 Hodgkin【人霍奇金淋巴瘤细胞】培养条件
1640,90%;**胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
传代方法
显微镜下观察细胞,当覆盖80%底面积时,进行细胞传代。注意不要等到细胞覆盖100%的时候才传代,那样细胞容易老化。在生物安全柜或者超净台中,将培养瓶中的培养基倒到废液缸中用PBS或者生理盐水洗一遍加入1.5ml 0.25%含有EDTA的胰酶,在37℃培养箱中消化3-5分钟后取出细胞,加入5ml培养基,吹打均匀后,转移到15ml离心管中,1000rpm 离心5分钟离心后,去掉上清,用新鲜培养基重悬细胞,按照1:3的比例进行细胞传代培养。
传代密度均匀,有以下几点比较重要:
1.尽量消化细胞分散成单细胞悬液。对于易于消化的细胞,我一般DPBS清洗一遍,加0.5ml胰酶润洗一遍(25cm2培养瓶或6孔板),弃掉胰酶,37度消化2-3分钟或室温消化5min左右,镜下观察是否细胞消化较为分散。如果不够,延长消化时间。我见过有些刚进实验室的师弟师妹,一上来就加1-2ml胰酶,结果细胞团大片脱落,虽然有后续吹打步骤,但我觉得效果不佳。至于难消化的细胞,怎么掌握分寸,还待自己摸索或其他战友分享。
2.在以上基础上,我觉得细胞吹匀,这步比上述提到的十字移动等更为重要。如传代1:4 ,可以收集所有细胞至离心管,加入培养液重悬混匀,吸管缓慢吹打20-30次,可配合水平摇晃离心管。
3.此外我觉得培养液的量可能也会有讲究,如6孔板中你*终加入2ml细胞悬液,尤其像这样的小面积培养皿,液体表面有张力,细胞易于聚集在中间,所以我一般6孔板再加1ml以消除影响,吸管缓慢吹打15-20次左右继续混匀。
传代方法:1:3-1:8传代,每周换液2次。
细胞简称:COLO 205(COLO205)细胞
细胞名称:COLO 205(COLO205);人结肠癌细胞
组织来源:结直肠腺癌,腹水转移
规 格:T25培养瓶,1×106cells
形态特征:贴壁/悬浮混合;上皮细胞样
生长特性:贴壁/悬浮混合
培养条件:RPMI-1640+10% FBS
传代方法:1:3-1:8传代,每周换液2次。
背景:该细胞系是1957年由T.U.Sample等从患有结肠癌的70岁男性白人的腹水中分离的,该病人在取腹水样品前已用5-氟尿嘧啶治疗4-6周,角蛋白免疫过氧化物酶染色阳性。
细胞简称:MRC-5(MRC5)细胞
细胞名称:MRC-5(MRC5);人胚肺细胞
组织来源:肺
规 格:T25培养瓶,1×106cellsL-540 Hodgkin人霍奇金淋巴瘤细胞
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