- EMT6小鼠乳腺癌细胞
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EMT6小鼠乳腺癌细胞
(1)请客户收到细胞株产品后,立即对外包装,细胞冻存管,细胞培养瓶等拍照,如有疑问或问题,须在24小时内通知上海信裕生物科技有限公司,提供照片和书面说明
(2.)请客户在收到复苏细胞后,迅速将原装的细胞瓶放入细胞培养箱内静置,3-4小时后,再使用传代(注:请客户观看细胞状态后。如若细胞已经长满且贴壁好,也可静止4小时左右后就传代
(3.)请使用新配制的培养体系
(4.)请客户培养细胞前三天,须对细胞生长状态进行拍照和注明时间,若细胞生长存在质量问题,须向上海本公司提供培养生长的照片和书面说明。
(5.)请客户仔细阅读细胞说明书,提前准备好相应的培养体系,避免造成细胞质量问题
EMT6小鼠乳腺癌细胞
注:(1),观察细胞在低倍镜(4或5X物镜)下进行,否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。
(2),瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗或无双抗的新培养基,细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。
(3),有些细胞贴壁不牢,如发现贴壁细胞脱落,可离心吹打后接种到新瓶内。
常见问题及解决方案
1、培养瓶有破裂,培养液有漏液:极大可能会污染,所以我们会及时安排帮老师解决。 2、细胞漂浮:培养瓶不开封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察,如细胞大部分又贴回瓶底,表明细胞活力正常,剩余漂浮的细胞可以去掉,留 10ml 培养液培养观察,细胞生长至汇合度 80%,进行消化传代;如细胞还是不贴壁,将细胞离心收集转到新培养瓶,原培养瓶加部分培养液继续培养,中间注意观察,我们的技术人员会一直跟踪指导,直到问题解决。
选择正确的培养基:不同的细胞可能培养基不同,甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞,有文献就选用neurobase培养基,而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的,而这种培养基中含有抗氧化剂成分,此时,我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。
瓶装血清一定要逐步解冻: 4℃冰箱全溶后再分装,在溶解过程中须规则摇晃均匀小心勿造成气泡,使温度与成分均一,减少沉淀的发生。勿直接由–20℃直接至37℃ 解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
热灭活是指56℃,30分钟加热已*解冻之血清。水浴锅升到56℃后,将血清放入,待温度升高到56℃后计时,一般5分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须,一般不要作此热处理,因为会造成沉淀物之显著增多,且会影响血清之品质。注意更换新血清包括不同批次对细胞的影响。【细胞缩写】" EMT-6细胞
【背景资料】 见细胞说明书
【细胞来源】 细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国内外著名大学建系
【代次】 P4
【规格】 复苏T25培养瓶(一瓶)或冻存1ml冻存管(两支)
"细胞冻存及复苏基本知识普及:
细胞冻存是细胞保存的主要方法之一。利用冻存技术将细胞置于-196℃液氮中低温保存,可以使细胞暂时脱离生长状态而将其细胞特性保存起来,这样在需要的时候再复苏细胞用于实验。而且适度地保存一定量的细胞,可以防止因正在培养的细胞被污染或其他意外事件而使细胞丢种,起到了细胞保种的作用。
除此之外,还可以利用细胞冻存的形式来购买、寄赠、交换和运送某些细胞。细胞冻存时向培养基中加入保护剂--终浓度5%.15%的甘油或二甲基亚砜DMSO,可使溶液冰点降低,加之在缓慢冻结条件下,细胞内水分透出,减少了冰晶形成,从而避免细胞损伤。
采用""慢冻快融""的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1 到 -2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内-196℃。【细胞数】" 1*10(6)
【生物安全级别】 1
【生物体】 小鼠
【组织来源】 乳腺
【细胞形态】 上皮细胞样
【细胞特性】 贴壁
【细胞活力】 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
【细胞检测】 细胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌