EA.hy926人视网膜微血管内皮细胞

人视网膜微血管内皮细胞*培养基多次重复实验证明人视网膜微血管内皮细胞在相应*培养基中能持续多次传代仍能保持原代细胞的分化状态。
    人视网膜微血管内皮细胞*培养基中已包含了高质量的血清和人视网膜微血管内皮细胞所需生长因子，可直接用于人视网膜微血管内皮细胞的培养。
单纯细胞培养的话，主要是这些耗材：

1. 人视网膜微血管内皮细胞*培养基一般试剂和耗材：

（1）*培养基：一般是用不*培养基+10%FBS（胎牛血清）自己配的，有时也添加双抗预防细胞感染。具体培养基类型根据你养的细胞类型去选择。

（2）胰蛋白酶：简称是胰酶，消化细胞用的。

（3）培养皿：10cm、6cm等，具体根据情况进行选择；有些特殊的细胞类型还会用到培养瓶。

（4）吸管、枪头、显微镜、50ml管等。

2. 人视网膜微血管内皮细胞*培养基细胞冻存试剂和耗材：

（1）冻存液：一般用10%DMSO+FBS+培养基组成，FBS和培养基的比例依细胞类型决定，比较珍贵的细胞一般用90%FBS，一般的细胞可以用50%FBS+40%培养基来配制。

（2）胰蛋白酶等用于细胞培养的一般试剂。

（3）冻存管、离心管、离心机、吸管、枪头、显微镜、冻存盒、冰箱、液氮罐等。

3. 人视网膜微血管内皮细胞*培养基细胞复苏试剂和耗材：

（1）一般试剂和耗材。

（2）水浴箱等。

EA.hy926人视网膜微血管内皮细胞

常见问题及解决方案:

1、培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决。

2、 细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决。

3、对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血清浓度，或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度。

4、对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中若出现细胞分布明显不均时（即某一区域细胞已重叠生长，而旁边则为一块空白），此时可将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。

复苏细胞注意事项：

1收到细胞后当天换液，全部更换成客户自己的新鲜培养基，放进培养箱，第二天再消化。

2边观察边消化，根据细胞的形态，终止消化时间，采取以半分钟间隔吹打细胞边缘，如可吹打下来，即终止消化。客户摸索比较好的消化时间。

3随细胞有一份细胞操作说明书，请客户仔细查看。

4记得加1%双抗，降低被污染的概率。另外尽早冻存留种，以备后用。

5售后时间为一周，仅限于细胞本身的质量问题，而因乙方自己不当操作（不规范操作，消化过度，不加双抗导致的污染等）导致的细胞问题不在售后范畴。

收到细胞后，如细胞状态不佳，或培养中遇到问题，烦请当天尽快联系，以便处理。当天及时反馈细胞情况和细胞照片是售后跟踪处理重要的参考依据，请您务必重视。

7刚收到细胞时，胎牛血清可以用15%培养两三天，利于细胞尽快恢复状态，细胞状态稳定后，再调回10%即可。