chang liver人张氏肝细胞

【产品商标】ATCC
【供应限制】仅供科研使用  
细胞培养的准备工作一定要做充分，准备至少两套高温高压消毒后的物品，做新的操作时先检点所有的东西是否准备齐全，比如配液时的滤器，分装所用的容器是不是足够等等。所有实验物品，包括自己配的液体和购买的产品，都要标记清楚（比如名称，PH值、时间、还有自己的名字，如果是共用一个冰箱的话这一点很重要）。冻存的物品尽量避免反复冻融，如果无法避免，也要尽早分装，一次用完。细胞计数在开始培养时很有必要，但计数次数多了经验估计法也是很好的办法，必竟每次计数也不是那么精确，而细胞培养对计数也不是那么要求严格。 一瓶细胞培养用液体尽量不要反复使用，这将增大污染机率。可用的办法即是将其分装成适当规格，一次用1瓶。细胞培养板或瓶若要摞在一起的话，注意在箱内不要超过3层，否则，中间的会受热不均，严重影响细胞质量，可造成细胞生长不均匀，可能造成中间稀少，四周密集。
本公司是一家生物企业，满足生物化学、分子生物学 、细胞生物学、免疫学 ELISA试剂盒等生物科技实验需求，其主营产品：ELISA试剂盒/人ELISA试剂盒/大鼠ELISA试剂盒/小鼠ELISA试剂盒/金标试剂盒/免疫组化试剂盒/标准品/科研抗体/生化试剂，生物培养基/细胞株/实验室耗材/动物血清等科研产品！

chang liver人张氏肝细胞

1)培养瓶有破裂，培养液有漏液：细胞极大可能会污染，所以我们会及时安排帮老师解决；2)细胞漂浮：培养瓶不开封，瓶口酒精擦拭后平躺放置在培养箱。次日观察，如细胞大部分又贴回瓶底，表明细胞活力正常，剩余漂浮的细胞可以离心去掉，留10ml培养液培养观察，细胞生长至汇合度80%，进行消化传代；如细胞还是不贴壁，将细胞离心收集转到新培养瓶，原培养瓶加部分培养液继续培养，中间注意观察，我们的技术人员会一直跟踪指导，直到问题解决；3)对于生长缓慢的贴壁细胞：可采用适当的提高培养基中血清浓度，或隔日换液的方法来保证细胞的状态和生长速度；4)对于生长不均的贴壁细胞：在培养过程中若出现细胞分布明显不均时(即某一区域细胞已重叠生长，而旁边则为一块空白)，此时可将细胞进行消化，重新打散，贴壁，加入新培养基进行培养。
细胞传代注意事项：①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材；②每天观察细胞形态，掌握好细胞是否健康的标准：健康细胞的形态饱满，折光性好，生长致密时即可传代；③如发现细胞有污染迹象，应立即采取措施，一般应弃置污染的细胞，如果必须挽救，可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗，随后培养基中加入较大量的抗生素，并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持：细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的特点，要做好建系的维持必须记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏：细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中，储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞产品包装：复苏形式：T25培养瓶(一瓶)或冻存形式：1ml冻存管(两支)
细胞形态特性：详见细胞说明书
细胞冻存的步骤：1)选择处于对数生长期的细胞，在冻存前一天换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉，用0.25% 胰蛋白酶消化。适时去掉胰蛋白酶，加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞，使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min，10分钟)；2)去上清液，加入含20%小牛血清的*培养基，于4℃预冷15分钟后，逐滴加入已无菌的DMSO或甘油，用吸管轻轻吹打使细胞均匀，细胞浓度为5×106～1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢？答案是不一定的，具体要看培养的细胞类型来选择；3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中，每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧，并标记好细胞名称和冻存日期，同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数)；4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中，-80℃冰箱过夜。；如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜，放入液氮罐);或者可以在4℃，2h;然后转到-20℃，2h;-80℃，2h;放入液氮罐；5)细胞冻存在液氮中可以长期保存，但为妥善起见，冻存半年后，取出一只冻存管细胞复苏培养，观察生长情况，然后再继续冻存。